Диагностика гепатита

Определить присутствие в организме гепатита одной из форм можно не сразу, поскольку инкубационный период заболевания может длиться до четырех недель. Когда же появляются первые признаки болезни, то в пораженном организме происходят радикальные изменения состава крови: биохимический анализ сообщает о серьезной проблеме со здоровьем и присутствии болезнетворного вируса. Однако для постановки окончательного диагноза вовсе недостаточно сдать кровь на гепатит, также необходима подробная диагностика гепатитов.

Проводить ее желательно после окончания инкубационного периода, чтобы врач с предельной точностью смог определить присутствующее в организме заболевание печенки. В противном случае назначенное лечение не даст желанного терапевтического эффекта и даже усугубит преобладающую клиническую картину.

Диагностика гепатита A

Как правило, диагностика гепатита A начинается с подробного расспроса пациента и назначения ряда анализов, которые необходимо выполнить в самые кратчайшие сроки. Это:

• биохимический анализ крови;
• полный клинический анализ крови;
• метод ПЦР;
• ИФА;
• коагулограмма.

Диагностика гепатита B

Диагностика гепатита C

• размеры печенки, селезенки, поджелудочной железы и желчного пузыря;
• патологические изменения в этих органах;
• состояние общего кровотока в органах брюшины;
• оптимальную зону для выполнения биопсии печени.

Этот метод клинического обследования определяет все очаговые патологии органа на микроскопическом уровне. Если на экране печень представлена в серой шкале, требуется немедленное проведение биопсии, поскольку серый цвет визуализирует пораженные ткани «человеческого фильтра».

Профилактика гепатитов

• мыть руки после улицы;
• подвергать качественной обработке свежие овощи, фрукты;
• выполнять все профилактические прививки, указанные в ежегодном календарном плане;
• избирательно относиться к сексуальным партнерам;
• избегать контакта с больными людьми;
• пользоваться только одноразовыми шприцами и проявлять особую бдительность на станциях переливания крови.

Также рекомендуется регулярно (один раз в полгода) сдавать кровь на гепатит, чтобы удостовериться, что вирус не проник в организм, и не поражает некогда здоровые клетки печенки. Если же диагноз определен, требуется немедленно стать на диспансерный учет и следовать всем рекомендациям специалиста.

lechupechen.ru

Клинические признаки

Обращаться за помощью в больницу нужно при первых признаках болезни. Чем раньше поставить диагноз, тем меньшие нарушения в организме произойдут.

Гепатит В не сразу дает о себе знать. Иногда инкубационный период затягивается до 6 месяцев. В этот период может не появиться никаких симптомов, но если сдать кровь на гепатит, можно обнаружить вирус. Именно поэтому иногда гепатит В выявляют совсем случайно.

Важно! Вирус в крови можно выявить через месяц после инфицирования.

В 70% случаев клинические признаки появляются уже через 3 месяца. Стоит отметить, что симптомы довольно невыразительные и их можно перепутать с другой болезнью.

• При гепатите В у больного появляется сильная слабость и быстрая утомляемость, болит голова, ноют суставы. Часто подымается температура. При таких признаках нужно обратиться к врачу, ведь это первые симптомы гепатита В.
• Очень часто на фоне повышения температуры появляются симптомы интоксикации и желтуха. Соответственно ухудшаются и анализы. Моча становится на цвет темной, а кал, наоборот,приобретает светлый оттенок. От начала инфицирования до появления желтухи обычно проходит некоторое время. Иногда пожелтение кожных покровов может и вовсе не наблюдаться. Нарастает желтуха в течение 10 дней, а спад начинается в период от недели до двух месяцев. В некоторых случаях на коже больного появляются папулезные высыпания. Может беспокоить сильная мышечная боль.В желтушный период печень и селезенка увеличиваются до максимальных размеров.
• После того как желтуха проходит состояние больного можно оценить, как удовлетворительное. Но печень остается увеличенной, а анализы печеночных проб также показывают существенные отклонения от нормы.

• Чаще всего у больных наблюдается легкая степень гепатита. При этом билирубин в крови не превышает 85 мкмоль/л, а протромбиновый индекс остается в пределах нормы.

• При средней степени тяжести билирубин может возрастать до 200 мкмоль/л, а симптомы интоксикации ярко выраженные. У больного наблюдается тошнота, рвота, желтуха, увеличение печени и ее болезненность.
• При тяжелых формах все показатели ухудшаются еще больше. Могут возникать злокачественные образования, что представляет опасность для жизни больного.

Основываясь на клинических проявлениях болезни, врачи назначают больному анализы на определение вируса гепатита В.

Анализы крови и другие методы диагностики

К методам ранней диагностики, кроме признаков болезни, можно отнести и обследование крови на уровень билирубина и печеночных ферментов. Обычно при высоком билирубине в крови уровень белковых веществ, как и ферментов значительно снижается. А это является показателем гепатита В.

Стоит отметить, что от значений некоторых показателей зависит исход лечения. Так по уровню протромбина в крови можно судить о тяжести состояния больного. При уровне протромбина ниже 10% спасти жизнь человека не удастся, если показатели находятся в пределах от 10 до 30%, то состояние довольно тяжелое. Если значение выше 30%, то больной скоро пойдет на поправку.

Диагностика крови включает в себя такие методы:

1. Анализ на маркеры вируса. Этот анализ имеет большое значение, ведь позволяет выявить вирус и антитела к нему. Результаты могут быть следующие: HBsAg или HBeAb положительный, HBeAg отрицательный, наличие антител.
2. ПЦР диагностика. Этот метод позволяет обнаружить активность и наличие ДНК вируса. Благодаря этому можно оценить концентрацию вируса. Результат может быть либо положительный, либо отрицательный.
3. Биохимия является второстепенным методом при обследовании на гепатит В, особенно при хронической его форме. При помощи этого анализа можно выявить уровень билирубина, АСТ и АЛТ ферментов печени. По их значениям можно судить о воспалении печени и о разрушении ее клеток. По результатам биохимии можно лишь судить о воспалительном процессе в печени, но не о наличии самого вируса.

Как же расшифровать результаты диагностики?

Разберемся в основных показателях.

1. HBsAg – это антиген вируса гепатита В, а именно его белковая молекула. Его можно выявить спустя 1-1,5 месяца после инфицирования при помощи ИФА анализа. Если результаты обследования положительные и выявлен этот антиген, то можно говорить об острой форме гепатита В (если при этом анализ на HBeAb и ДНК вирус также положительный) и носительстве вируса (при сочетании с Anti-HBc).
2. HBeAb является белком ядра вируса. Он свидетельствует о высокой вирусной нагрузке. Его показатели возрастают одновременно с размножением вируса. Заразиться кровью такого больного очень легко, ведь такой человек является носителем вируса гепатита В. При наличии этого маркера можно говорить об острой форме гепатита или обострении хронической формы, высокой вероятности инфицирования и плохих прогнозах на выздоровление. Если HBeAbотрицательный при положительном HBsAg, то можно говорить о неактивном носительстве вируса.
3. ДНК свидетельствует об активном размножении вируса гепатита В, а это свидетельствует о том, что болезнь находится в острой или хронической активной стадии. Также при положительном результате можно говорить о неэффективности лечения.

Чтобы оценить состояние печени, степень фиброзных изменений ее тканей, нужно применять другие методы.

Какие еще существует методы?

Диагностику гепатита лучше всего проводить комплексно с использованием нескольких методов. Изначально врач ориентируется по клиническим симптомам и жалобам пациента, а после переходит к лабораторным методам исследования.

Очень часто вслед за общим анализом крови и биохимией больному необходимо пройти УЗИ печени и органов ЖКТ (желудочно-кишечный тракт). Если после такого обследования врач сомневается в постановке диагноза, то делают биопсию печени.

Эта процедура основана на взятии биологического материала на обследование. Для этого при помощи специальной иглы через отверстие в брюшной полости берут кусочек печени. После чего его изучают под микроскопом, где видно все изменения, которые происходят в печени. Можно определить степень повреждения тканей печени. Несмотря на то что биопсия абсолютно безопасна для здоровья человека, применяют ее лишь в самых последних случаях.

В развитых странах используют метод фиброэластографии. С его помощью можно оценить состояние печени без оперативного вмешательства. Специальный датчик прикладывают на кожу в область печени, и определяют плотность тканей органа. Этот метод схож с ультразвуковым исследованием.

Рекомендуем прочитать:

pechen1.ru

Дифференциальная диагностика гепатита В

Острый гепатит В в первую очередь необходимо дифференцировать с другими вирусными гепатитами: А, С, Е, D.

Представленные в таблице клинические критерии вирусных гепатитов следует считать ориентировочными, поскольку на их основе можно выявить особенности вирусных гепатитов лишь при групповом анализе, тогда как окончательный этиологический диагноз возможно поставить только при определении в сыворотке крови специфических маркеров.

Объективные трудности нередко возникают и при проведении дифференциальной диагностики гепатита В с другими заболеваниями, чей перечень определяется возрастом пациента, формой тяжести и фазой патологического процесса, Так, например, в преджелтушном периоде гепатит В наиболее часто приходится дифференцировать с острыми респираторными вирусными заболеваниями, поражениями желчевыводящих путей, пищевыми отравлениями, острыми кишечными инфекциями, различной хирургической патологией органов брюшной полости и др. В общих чертах дифференциально-диагностические критерии в этих случаях мало чем отличаются от таковых при гепатите А. То же можно сказать и в отношении дифференциальной диагностики гепатита В в желтушном периоде. Основной крут заболеваний, с которыми чаще всего приходится дифференцировать гепатит В на высоте заболеваний, практически такой же, как и при гепатите А. Среди так называемых надпеченочных желтух это различные затянувшиеся формы наследственных и приобретенных гемолитических анемий, протекающих с синдромом холестаза; среди печеночных или паренхиматозных желтух — большая группа наследственных пигментных гепатозов (синдромы Жильбера, Дабина-Джонсона, Ротора); различные инфекционные заболевания, сопровождающиеся поражением паренхимы печени (инфекционный мононуклеоз, желтушные формы лептоспироза, кишечный иерсиниоз и псевдотуберкулез, висцеральные формы герпетической инфекции, описторхоз и др.), а также токсические и медикаментозные поражения печени и др. Большие сложности в проведении дифференциальной диагностики могут возникать и при разграничении гепатита В с подпеченочными желтухами, возникшими на почве закупорки общего желчного протока опухолью, кистой или камнем при желчнокаменной болезни. Общие принципы проведения дифференциальной диагностики во всех этих случаях также полно изложены выше.

Отмечая схожесть дифференциально-диагностических критериев при гепатитах А и В, необходимо все же обращать внимание и на их своеобразие, в основном отражающее особенности течения патологического процесса при этих гепатитах. Суть различий в том, что гепатит А — это всегда острая, циклически протекающая доброкачественная инфекция, и при данном гепатите нет необходимости проводить дифференциальную диагностику с многочисленными хроническими заболеваниями печени. При гепатите В в силу того, что патологический процесс нередко имеет длительное течение, возникает необходимость исключать другие длительно текущие заболевания печени (описторхоз, болезни крови, наследственные врожденные аномалии обмена веществ, лекарственные гепатиты и др.).

В основу дифференциальной диагностики в таких случаях должны быть положены результаты лабораторных методов исследования и тщательный учет общих симптомов, свойственных этим заболеваниям. Однако в ряде случаев удается выявить и достаточно характерные клинико-биохимические черты поражения печени при отдельных нозологических формах.

Так, например, при болезнях системы крови (острый лейкоз, лимфогранулематоз) поражение печени в связи с лейкемической инфильтрацией проявляется в основном значительным увеличением органа (нижний край печени выступает на 3-5 см ниже реберной дуги), непостоянным повышением в сыворотке крови активности печеночно-клеточных ферментов (АЛТ, ACT и др.) и содержания конъюгированного билирубина. Показатель тимоловой пробы обычно в пределах нормы или слегка повышен, умеренно возрастает содержание холестерина, бета-липопротеидов, гамма-глобулина. В отличие от гепатита В, поражение печени при болезнях системы крови часто возникает на фоне стойкого повышения температуры тела и сопровождается резко выраженным увеличением селезенки, увеличением периферических лимфатических узлов, быстро прогрессирующей анемией, характерными гематологическими изменениями. Важно также отметить, что специфическое поражение печени при болезнях системы крови, по-видимому, встречается крайне редко. Во всяком случае, по данным нашей клиники, среди 233 детей с гемобластозами (в том числе с острым лейкозом — 78, лимфогранулематозом — 101, лимфосаркомой — 54) поражение печени отмечалось у 84, и у всех был документирован гепатит В или С. Изолированною поражения печени за счет лейкемоидной инфильтрации или токсического гепатита в связи с лечением цитостатиками ни в одном случае не наблюдалось.

Большие трудности могут возникать при дифференциации острого гепатита В с обострением хронического гепатита или цирроза печени, особенно в том случае, если последние протекали латентно и своевременно не были диагностированы. Исследования, проведенные на нашей кафедре, показали, что практически все гак называемые желтушные обострения хронического гепатита есть не что иное, как результат наслоения на хронический гепатит В острого гепатита А или D. Заболевание в этих случаях обычно манифестирует подъемом температуры тела, появлением симптомов интоксикации, желтухой, гепатомегалией, повышением в сыворотке крови уровня конъюгированного билирубина и активности печеночно-клеточных ферментов, что, казалось бы, дает основание диагностировать острый гепатит В. Однако при наблюдении за этими больными в динамике выясняется, что после исчезновения клинических симптомов острой фазы болезни у ребенка сохраняются гепатолиенальный синдром, незначительная персистируюшая гиперферментемия и обнаруживается HBcAg, тогда как антитела к корове кому антигену класса IgМ не выявляются или бывают в низком титре без существенных колебаний. Решающее значение для диагностики имеет обнаружение в сыворотке крови специфических антител класса IgМ к вирусу гепатита А или D, что позволяет диагностировать в этих случаях вирусный гепатит А или D у пациента с хронической НВV-инфекцией.

Поражения печени, возникающие у больных с врожденными аномалиями обмена веществ (тирозиноз, гликогеноз, гемохроматоз, липоидоз и др.), чаще приходится дифференцировать с хроническим, челе с острым гепатитом В.

Поражение печени при глистных инвазиях

При описторхозе и других глистных инвазиях поражение печени лишь отдаленно может напоминать острый гепатит В. Общими симптомами при этих заболеваниях могут быть желтуха, увеличение печени, артралгии, повышение температуры тела, диспептические явления. Однако, в отличие от гепатита В. при описторхозе, например, температура тела и симптомы интоксикации сохраняются длительное время, достигая максимальной выраженности не в начальном преджелтушном периоде, как это обычно бывает при вирусном гепатите, а в желтушном периоде. При этом весьма характерна резкая болезненность печени при пальпации; активность ферментов в сыворотке крови часто остается в пределах нормы или слегка повышена. Важное дифференциально-диагностическое значение имеет картина периферической крови, При описторхозе обычно наблюдаются лейкоцитоз, эозинофилия, умеренное увеличение СОЭ.

У детей первого года жизни острый гепатит В необходимо дифференцировать с септическим поражением печени, атрезией желчных путей, врожденными гепатитами, вызываемыми цигомегаловирусом, листериями, а также с затянувшейся физиологической желтухой, каротиновой желтухой, токсическим гепатитом, врожденным фиброзом печени, альфа-1-антитрипеиновой недостаточностью и многими другими врожденными обменными заболеваниями печени.

Поражение печени при сепсисе

При сепсисе поражение печени обычно возникает вторично, на фоне выраженного септического процесса и тяжелого общего состояния больного. При биохимическом анализе отмечается несоответствие между’ высоким содержанием конъюгированного билирубина и низкой активностью печеночно-клеточных ферментов Решающее значение для диагноза имеет картина периферической крови, лейкоцитоз с нейтрофильным сдвигом повышенная СОЭ в случае септического гепатита и нормальная кар-тина при гепатите В.

Атрезия внепеченочных желчных протоков

Основными симптомами при атрезии внепеченочных протоков служат обесцвечивание испражнений, темная окраска мочи и желтуха, появляющиеся сразу после рождения ребенка (полная атрезия) или в течение первого месяца жизни (частичная атрезия). Независимо от сроков появления, желтуха постепенно нарастает, и в конечном итоге кожный покров принимает шафрановый цвет, а в дальнейшем — зеленовато-грязный в связи с превращением билирубина в коже в биливердин, кал при этом постоянно ахоличен, стеркобилин в нем не определяется, моча интенсивно окрашена за счет возрастания желчного пигмента, тогда как реакция на уробилин всегда отрицательная. Печень постепенно увеличивается, ее мягкая консистенция сохраняется в течение первых 1-2 мес, »дальнейшем обнаруживается постепенное уплотнение органа, ив возрасте 4-6 мес печень становится плотной и даже твердой вследствие формирующегося билиарного цирроза. Селезенка в течение первых недель жизни обычно не увеличена, но по мере развития цирроза печени и формирования портальной гипертензии появляется спленомегалия. Общее состояние детей в первые месяцы жизни не страдает, Однако в дальнейшем (обычно на 3-4-м месяце жизни) дети становятся вялыми, плохо прибавляют в массе, у них нарастают симптомы портальной гипертензии (расширение вен на передней брюшной стенке, асцит), увеличивается объем живота за счет гепатоспленомегалии и метеоризма. В терминальной фазе болезни появляется геморрагический синдром в виде кровоизлияний в кожу и слизистые оболочки, возможны кровавая рвота и стул с кровью, Без оперативного вмешательства дети умирают на 7-9-м месяце жизни от прогрессирующей печеночной недостаточности вследствие вторичного билиарного цирроза печени.

В сыворотке крови у больных атрезией внепеченочных желчных путей обращает на себя внимание высокое содержание конъюгированного билирубина, общего холестерина, значительно повышенная активность щелочной фосфатазы, у-глутамилтранспептидазы, 5-нуклеотидазы и других экскретируемых печенью ферментов, тогда как активность печеночно-клеточных ферментов (AJIT, ACT, Ф-1-ФА, глутаматдегидрогеназы, уроканиназы и др.) в течение первых месяцев жизни остается в пределах нормы и умеренно повышена на заключительных этапах болезни. При атрезии желчных путей остаются нормальными показатели тимоловой пробы, содержание протромбина, не бывает дисиротеинемии,

Среди других методов исследования для диагностики атрезии внепеченочных и внугрипеченочных желчных ходов имеют значение ретроградная холангиопанкреатография, в ходе которой удается заполнить рентгеноконтрастным веществом желчевыводящие пути и таким образом определить их проходимость; сцинтиграфическое исследование с бенгальским розовым, позволяющим установить полное отсутствие пассажа желчи в двенадцатиперстную кишку при полной непроходимости или отсутствии внепеченочных желчных ходов; прямая лапароскопия, позволяющая видеть желчный пузырь и внепеченочные желчные протоки, а также оценить внешний вид печени. Дополнительную информацию о состоянии желчных путей можно получить при УЗИ и КТ печени.

Дня исключения атрезии внутрипеченочных желчных ходов решающее значение имеет гистологическое исследование ткани печени, полученной при пункционной или хирургической биопсии, позволяющее выявить уменьшение или отсутствие междольковых желчных путей, а также наличие портального фиброза разной степени выраженности или воспалительную инфильтрацию портальных пространств и гигантские клетки в паренхиме.

Синдром сгущения желчи

Синдром механической желтухи может возникать при сгущении желчи у детей с затянувшейся физиологической желтухой или гемолитической желтухой, а также за счет сдавления общего желчного протока увеличенными лимфатическими узлами, опухолью или кистой общего желчного протока. Во всех этих случаях появляются клинические симптомы, связанные с уменьшением или полным прекращением оттока желчи: прогрессирующая желтуха за счет повышения конъюгированного билирубина, обесцвечивание кала, темная моча, зуд кожи, увеличение в крови уровня холестерина, желчных кислот, бета-липопротеидов. высокая активность щелочной фосфатазы при низких показателях активности печеночно-клеточных ферментов и др. Решающее значение дня диагностики могут иметь УЗИ, а также КТ и отрицательные результаты определения маркеров НВ-вирусной инфекции

Токсическое поражение печени

При употреблении различных лекарств [хлорпромазин (аминазин), атофан, метатестостерон, галотан (фторотан) и др.] могут появляться клинические симптомы и биохимические сдвиги в сыворотке, как и при остром гепатите В. Олнако возникновение желтухи на фоне лечения гепатотоксичными лекарственными препаратами, отсутствие преджелтушного периода, торпидное течение желтухи по тип) холестаза без выраженной гиперферментемии, диспротеинемии и исчезновение желтухи после отмены лекарственного препарата позволяют предполагать медикаментозное поражение печени. При морфологическом исследовании ткани печени, полученной путем прижизненной пункционной биопсии, в этих случаях обнаруживается картина жирового гепатоза.

Врожденные или неонатальные гепатиты

Цитомегаловирусный, листерелезный и другие гепатиты, как правило, проявляются сразу после рождения ребенка. Преджелтушного периода в этих случаях не бывает. Состояние детей тяжелое: гипотрофия, мраморность кожного покрова, общий цианоз; желтуха выражена умеренно, кал частично обесцвечен, моча насыщенная. Температура тела обычно повышена, но может быть нормальной. Характерны выраженный гепатолиенальный синдром, геморрагические проявления в виде высыпаний на коже, подкожных кровоизлияний, желудочных кровотечений. Течение болезни длительное, торпидное. Дети долго остаются вялыми, плохо прибавляют в массе; желтуха наблюдается более месяца. На протяжении многих месяцев остаются увеличенными печень и селезенка. Для дифференциальной диагностики гепатита В с врожденными гепатитами биохимические исследования имеют второстепенное значение.

О врожденном гепатите свидетельствуют неблагоприятный акушерский анамнез матери, а также сочетание симптомов поражения печени с другими проявлениями внутриутробного инфицирования (пороки развития ЦНС, сердца, почек, поражение легких. ЖКТ и др.). Решающее значение для установления диагноза врожденного гепатита могут иметь специфические методы исследования обнаружение ДНК и РНК возбудителей методом ПЦР, выявление антител класса IgМ к возбудителям цитомегалии, листереллеза с помощью иммуноферментного анализа или обнаружение нарастания титра общих антител в реакции связывания комплемента (РСК ). PH ГА и др.

Дефицит а1-антитрипсина

Заболевание обычно проявляется в первые 2 мес жизни желтухой, обесцвечиванием кала, потемнением мочи, увеличением печени. Симптомы интоксикации отсутствуют, а желтуха имеет застойный характер, что заставляет предполагать атрезию внепеченочных желчных ходов, но не гепатит В. В сыворотке крови при дефиците а1-антитрипсина повышено содержание исключительно конъюгированного билирубина, общего холестерина, бывают высокими показатели активности щелочной фосфатазы и других экскретируемых печенью ферментов, тогда как активность печеночно-клеточных ферментов длительное время остается в пределах нормы. При гистологическом исследовании пунктата печени часто обнаруживается картина дуктулярной гипоплазии, иногда затяжного неонатального холестаза или цирроза печени. Очень характерно обнаружение ШИ К -положительных телец, расположенных внутри многих гепатоцитов, представляющих собой скопления а1-антитрипсина. При циррозогенной направленности процесса выявляются портальный фиброз, мелкоузелковая регенерация в сочетании с явлениями дуктулярной гипоплазии.

Врожденный фиброз печени

Это тяжелое врожденное заболевание, характеризующееся разрастанием соединительной ткани по ходу портальных трактов, наличием в них множества желчных микрокист и явлениями гипоплазии внутрипеченочных разветвлений воротной вены. Клинически заболевание проявляется увеличением объема живота, усилением рисунка венозной сети на брюшной и грудной стенках, резким увеличением и уплотнением печени, селезенки, кровотечением из варикозно расширенных вен пищевода и желудка. Дети отстают в физическом развитии. В то же время функциональные пробы печени остаются практически нормальными. При контрастировании желчных путей можно видеть увеличение их калибра. Диагностика существенно упрощается, если выявляется сопутствующий поликистоз почек. Решающее значение дня постановки диагноза врожденного фиброза печени имеют результаты пункционной биопсии печени. При гистологическом исследовании выявляется резкое расширение портальных трактов, содержащих мощные пласты зрелой соединительной ткани с множеством мелких кистозно расширенных желчных протоков, и явления гипоплазии разветвлений воротной вены.

Каротиновая желтуха

Возникает вследствие избыточного употребления морковного сока, мандаринов и других фруктов и овощей, окрашенных в оранжевый цвет. В отличие от гепатита В, при каротиновой желтухе отмечаются неравномерное прокрашивание кожного покрова: более интенсивное на ладонях. стопах, ушных раковинах, вокруг рта, около носа, и полное отсутствие желтушности склер. Общее состояние детей не нарушено, функциональные пробы печени не изменены.

Синдром Рея

Злокачественную форму гепатита В с молниеносным течением иногда приходится дифференцировать е синдромом Рея, при котором коматозное состояние возникает вследствие стеатоза печени, приводящего к тяжелым нарушениям в метаболизме аммиака. В отличие от гепатита В, при синдроме Рея желтуха слабая или отсутствует, ведущими симптомами являются гепатомегалия, геморрагические проявления, повторная рвота, судороги, потеря сознания и кома. Из биохимических сдвигов наиболее характерны гипераммониемия, гипертрансаминаземия, гипогликемия, иногда повышается содержание конъюгированного билирубина, часто обнаруживается метаболический ацидоз или дыхательный алкалоз, характерны нарушения в системе гемостаза. При гистологическом исследовании ткани печени выявляется картина массивного жирового гепатоза без признаков воспалительной инфильтрации и без явлений некроза паренхимы печени.

ilive.com.ua

 Метод полимеразной цепной реакции

В современной лабораторной диагностике ПЦР занимает особое место. Метод ПЦР поднял клиническую лабораторную диагностику па принципиально иную высоту — уровень определения нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), что позволяет провести прямое обнаружение инфекционного агента или генетической мутации в любой биологической среде.

При этом способом ПЦР теоретически может быть обнаружена одна искомая молекула нуклеиновой кислоты среди миллионов других. С точки зрения клинической медицины определение нуклеиновой кислоты равнозначно обнаружению возбудителя в объекте исследования.

Из биологии известно, что нуклеиновые кислоты (ДНК или РНК) обладают свойством к саморепродукции (воспроизводству). Этот принцип и лежит в основе метода ПЦР, когда этот процесс осуществляется искусственно в лабораторных условиях. Для этого из полученного от больного образца ткани (например, в случае подозрения на вирусный гепатит) выделяют сначала нуклеиновую кислоту.

Она выполняет роль своеобразной «матрицы», на которой осуществляется синтез. Нуклеиновая кислота имеет свой «отпечаток» — уникальную последовательность нуклеотидов, из которых она состоит. Для каждого возбудителя такая последовательность изучена, составлена своеобразная «карта».

Самый главный элемент в ПЦР — это праймер (короткие участки ДНК, комплементарные (соответствующие) участкам выделенной из образца нуклеиновой кислоты). Праймеры обеспечивают запуск и специфичность реакции.

Таким образом, тест-система для ПЦР состоит из смеси нуклеиновых кислот испытуемого образца, праймера и специальных ферментов (полимераз)) с помощью которых эта реакция невозможна. ПЦР-анализ включает несколько циклов (этапов), в результате которых получаются точные копии распознаваемого участка матричной нуклеиновой кислоты. Эти циклы повторяются 30–50 раз в соответствии с заданной программой. Конечный продукт этой реакции распознается с помощью метода электрофореза в геле.

Показатель «чувствительности»

Одним из важнейших критериев диагностической эффективности любого лабораторного анализа является показатель «чувствительности». При этом следует различать аналитическую и диагностическую чувствительность. Аналитическая чувствительность, применительно к ПЦР, представляет собой то минимальное количество копий ДНК или РНК в 1 мл раствора образца, которое может быть определено данной тест-системой.

Большинство коммерческих тест-систем позволяет обнаружить в биологической пробе искомую нуклеиновую кислоту, даже если ее концентрация составляет несколько сот копий в 1 мл образца. С этим связано общее положение, определяющее клиническую пригодность любых лабораторных способов диагностики или тест-систем — диагностическая чувствительность метода не должна быть ниже 95–98 %.

Второй универсальный критерий лабораторной эффективности — «специфичность», которая определяется процентом здоровых людей, имеющих истинно отрицательные результаты анализа. Метод ПЦР обладает высочайшей специфичностью, которая достигает 99-100 %.

Диагностическая чувствительность и специфичность ПЦР сопоставимы, а зачастую и превосходят показатели, обеспечиваемые другими методами, которые являются «золотым стандартом» в диагностике инфекционных заболеваний.

Результаты ПЦР-анализа можно получить в течение одного рабочего дня, при этом отобранные для анализа пробы могут храниться (накапливаться) в течение даже нескольких недель при соблюдении соответствующих температурных норм. Проведенная недавно в нескольких зарубежных исследовательских центрах суммированная оценка чувствительности различных методов диагностики показала, что ИФА имеет чувствительность 50–70 %, а ПЦР — от 90 до 100 %.

ПЦР, по сравнению с ИФА и другими способами, обладает двумя важными преимуществами: высокой чувствительностью и непродолжительностью анализа по времени, то есть «актуальностью» получения результата исследования врачом и пациентом.

Перед другими методами клинической лабораторной диагностики существуют преимущества ПЦР:

— метод позволяет обнаруживать любые ДНК и РНК даже в тех случаях, когда с помощью других способов это сделать невозможно;

— метод обладает высокой специфичностью (до 100 %). Она обусловлена тем, что в исследуемом «материале определяется уникальный фрагмент нуклеиновой кислоты, характерный только для данного возбудителя или гена;

— возможность проведения не только качественной (наличие), но и количественной (концентрация) оценки содержания нуклеиновой кислоты. В настоящее время с помощью коммерческих тест-систем можно определять несколько сот копий в исследуемом образце;

— высокая технологичность и автоматизация метода позволяют врачу получить результаты исследования и ознакомить с ними пациента в день проведения анализа;

— ПЦР позволяет выявить возбудителя в организме еще до развития заболевания, например, в инкубационном периоде;

— для проведения ПЦР—анализа достаточен минимальный объем пробы (до нескольких микролитров);

— ПЦР-анализ позволяет одновременно диагностировать несколько возбудителей заболеваний в одной пробе без ущерба для чувствительности или специфичности результата;

— полученные результаты ПЦР можно вносить в компьютерные информационные носители или фотографировать для дальнейшей оценки независимыми экспертами.

Несмотря на вышеуказанные достоинства метод ПЦР все же не лишен некоторых недостатков, которые следует учитывать при оценке результатов исследований:

— высочайшие требования к оснащению лаборатории, качеству тест-систем и строжайшее соблюдение регламента исследования во избежание получения ложных результатов. Решение проблемы качества анализов возможно при соответствующей квалификации персонала и обязательной сертификации лаборатории;

— неоднозначная оценка положительного результата ПЦР. Именно этот факт зачастую является необоснованным аргументом врачей-практиков для сомнения в полученном результате и эффективности метода ПЦР. Например, у лиц с обнаруженной в крови методом ПЦР ДНК возбудителя клинически заболевание может развиться не всегда.

В данной ситуации при оценке ПЦР-анализа следует говорить об инфицированное больного, а не о развитии инфекционной болезни. Метод ПЦР — анализа позволяет определять наличие или отсутствие возбудителя, в значительной мере отвечает на вопрос «лечить не лечить», а также дает возможность оценить качество лечения путем контроля наличия или отсутствия возбудителя. Врач, оценивая итог ПЦР-анализа, осознает, что этот результат является не единственным аргументом в принятии решения о начале лечения или отказе от него.

Для каждого вида возбудителя вирусных гепатитов разработаны тест-системы, но наиболее ценным метод ПЦР оказался в диагностике вирусов гепатитов В, С, D, G. Метод ПЦР является крайне важным для диагностики гепатита В. Это связано с тем, что среди множества разновидностей этого вируса встречаются мутантные (с измененными признаками), которые не определяются обычными серологическими тестами.

Метод ПЦР-анализа позволяет выявить, и какой форме находится вирус гепатита 15, способен ли он к самостоятельному размножению или интегрировался (встроился) в ДНК клетки-хозяина. Это имеет крайне важное клиническое значение, так как при интегративной форме этой инфекции человек не заразен для окружающих (безопасность для полового партнера, профессиональная пригодность, отсутствует риск вертикальной передачи вируса от матери к плоду и т. п.).

Кроме того, таким пациентам не показана противовирусная терапия, более того — она даже опасна. Вместе с тем, при интегративной форме инфекции резко возрастает (более чем в 200 раз) вероятность развития рака печени. Таким людям необходимо не менее одного раза в год проходить комплексное клинико-лабораторное и инструментальное обследование.

Метод ПЦР может выступать в качестве арбитра для определения необходимости начала лечения и контроля его эффективности. Быстрое исчезновение из крови ДНК вируса гепатита В является прямым и надежным тестом успешного исхода противовирусного лечения.

Таким образом, определение ДНК вируса гепатита В в плазме крови является важнейшим анализом, который в совокупности с другими лабораторными исследованиями позволяет объективно диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

Метод ПЦР—анализа не имеет себе равных и в диагностике, оценке прогноза и успеха противовирусной терапии инфекции, вызванной вирусом гепатита С. Применение ПЦР позволяет выявлять вирус гепатита С на самом раннем этапе инфекционного процесса, поскольку РНК вируса гепатита С может обнаруживаться в сыворотке крови уже через неделю после инфицирования. С помощью этого метода определяют генетические разновидности этого вируса, которые позволяют врачу назначить правильное лечение.

В случае вирусного гепатита D метод ПЦР-анализа позволяет определить вирусную РНК в сыворотке крови пациента, а также смешанную гепатит В и D инфекцию. Поэтому данный метод исследования может использоваться для контроля эффективности лечения, прогноза течения и исхода болезни. Врачу важно определить, имеется ли смешанная инфекция, так как гепатит D усиливает некротический эффект при гепатите В, а, стало быть, повышает риск его развития.

Метод ПЦР-анализа в настоящее время остается единственным способом доказать наличие заражения вирусом гепатита С.

Рассмотрим применение методов диагностики для разных гепатитов

Гепатит Е. Основными диагностическими признаками вируса гепатита Е являются: предположение о водном механизме передачи, возраст больного от 20 до 40 лет, распространение в регионах преимущественно тропического и субтропического пояса, клинические проявления подобно гепатиту А с преобладанием легких форм, регистрация тяжелых форм с угрозой летального исхода у беременных женщин во второй половине беременности, реже — в раннем послеродовом периоде и у кормящих матерей (протекают с интенсивным гемолизом, гемоглобинурией, острой почечной недостаточностью и тяжелым тромбогеморрагическим синдромом). Подтверждает диагноз выявление антител в крови.

Гепатит В. Вирусный гепатит В врачи подозревают в случае, если заболевшему за 45-180 дней до начала болезни переливали кровь или ее компоненты (эритроцитарную, лейкоцитарную, тромбоцитарную массу), проводили оперативные вмешательства, исследования внутренних органов, многочисленные инъекции (в том числе наркотиков), или, что случается гораздо реже, если больной имел половой или тесный контакт с больным гепатитом В. Критерием раннего подтверждения диагноза служит обнаружение в крови HBs, НВе и НВс-антигенов, а также вирусной ДНК.

Серологические маркеры при остром гепатите В

Серологические маркеры	Период болезни	Период выздоровления	После выздоровления
Инкубационный	Острая фаза
Начало 4-12 нед.	Конец 1-2 нед.	2 нед.	3 мес.	3-6 мес.	Годы
ДНК	—	+	+	—	—	—
HBs-антиген	+	+	+	+	+/-	—
НВе-антиген	—	+	+	—	—	—
Антитела IgM	—	—	+	+	+/-	—
Антитела НВс	—	—	+	+	+	+
Антитела НВе	—	—	—	+	+	+/-
Антитела HBs	—	—	—	—	-/+	+

Гепатит С. В отличие от гепатита В, в диагностике которого учитываются антигенные и антительные маркеры, при гепатите С методом ИФА улавливаются только антитела, что связано с низкой концентрацией вируса в крови. Антигены вируса гепатита С могут быть обнаружены в биоптатах печени.

Лабораторная диагностика включает в себя три основных вида анализов.

Серологические маркеры при остром гепатите С

Серологические маркеры	Период болезни	Период выздоровления	После выздоровления
Инкубационный	Острая фаза
Начало 4-12 нед.	Конец 1-2 нед.	2 нед.	3 мес.	3-6 мес.	Годы
РНК	—	+	+	—	—	—
Антитела IgM	—	—	-+	+-	—	—
Антитела IgG	—	—	-+	+	+	+-

Определение антител. Несмотря на высокую специфичность, современные диагностические иммуноферментные системы не застрахованы от гипердиагностики, то есть отложноположительных результатов. Для их исключения также требуется оценка на основе результатов анализов, полученных через разные промежутки времени. Возможны и ложноотрицательные результаты, когда антивирусные антитела не удается обнаружить, несмотря на присутствие вируса в организме. Это бывает в следующих случаях:

— начальный период заболевания;

— во время приема больными иммунодепрессантов — препаратов, подавляющих иммунную систему;

— при заражении некоторыми генотипами (прежде всего 3 и 4).

В настоящее время выпускаются коммерческие тест-системы для выявления антител к вирусу гепатита С 1-го генотипа. Однако такие тесты могут быть недостаточно эффективны для надежного определения антител при инфицировании вирусом иного генотипа. Это имеет огромное значение для регионов, где превалируют вирусы других типов. Таким образом, для эффективной диагностики гепатита С необходим высокочувствительный тест, способный реагировать с антителами к вирусу гепатита С любого генотипа.

Определение вирусной РНК. С диагностической целью производится обнаружение РНК вируса гепатита С. На сегодняшний день этот тест считается «золотым стандартом» в диагностике гепатита С. Для этого наиболее широко используется классический вариант полимеразной цепной реакции (ПЦР). С ее помощью удается следить за размножением вируса, а также судить о присутствии его в печени и других тканях. Определение РНК наиболее часто применяют для подтверждения результатом выявления антител, постановки раннего диагноза острою гепатита (вирусную РНК удается обнаружить уже на 7-21-й день после инфицирования, то есть задолго до появления первых антител), для наблюдения за беременными в перинатальный период заражения и контроля за эффективностью антивирусной терапии.

Данные этих двух анализов хорошо дополняют друг друга. Положительные результаты ПЦР-анализа в сочетании с отрицательными результатами на антивирусные антитела характерны для некоторых периодов острого гепатита. Негативные показатели ПЦР-анализов на фоне положительных антительных тестов могут быть следствием низкой (не улавливаемой в ПЦР) концентрации вируса в крови. Повторные положительные ПЦР-анализы крови отражают активацию вируса в клетках печени или других органов.

Также ПЦР применяется для обнаружения вируса в тканях печени, взятых при биопсии. Это дает более полную информацию о развитии инфекционного процесса, так как вирус способен длительное время находиться в гепатоцитах, не выходя в кровь или присутствуя в ней в низких концентрациях. Это чаще происходит на ранних этапах инфекции, но наблюдается и при хроническом гепатите.

Определение белков (антигенов) вируса гепатита С. Принципиальная возможность выявления белков вируса гепатита С была установлена вскоре после открытия вируса при иммунофлюоресцентном изучении тканей, взятых из печени больных хроническим гепатитом С людей и шимпанзе, зараженных этим вирусом.

Определение вирусных белков (антигенов) в сыворотке крови из-за их низкого содержания долго не удавалось. Лишь недавно были разработаны методические подходы для иммуноферментного выявления внутреннего С-белка в крови и организовано производство первых коммерческих тест-систем. Их внедрение в практику позволит решать спорные вопросы диагностики на более экономичной основе, чем определение вирусной РНК. Определение уровней АлАТ является наиболее дешевым методом оценки активности течения гепатита С. Однако однократно полученные данные могут быть недостаточными для определения тяжести заболевания.

Более важную информацию относительно поражения печени может дать определение концентрации АлАТ в течение нескольких месяцев. Получить информацию о степени поражения печени, недоступную при других методах исследования, может дать врачу биопсия печени. Данные, полученные в результате этой процедуры, позволяют принять решение в пользу начала или отмены противовирусного лечения.

В статье использованы материалы из открытых источников: Автор: Трофимов С. — Книга: «Болезни печени»

По материалам: health-medicine.info

health-medicine.info

Лабораторная диагностика гепатита

Лабораторная диагностика основана на выявлении специфических маркеров инфицирования вирусом (РНК вируса гепатита С, анти -IgM/G).

По результатам анализов назначаются дополнительные анализы на гепатит, после чего определяются с курсом лечения:

• при нормальных показателях биохимического спектра пациент находится под наблюдением лечащего врача в соответствии с медицинскими стандартами;

• при превышении двух норм показателей биохимического спектра сыворотки крови: АСТ, АЛТ, ЩФ и общего билирубина — проводят иммунно-ферментный анализ крови на анти-HCV;

• при положительном результате иммунно-ферментного анализа на гепатит, а также в случае выявления РНК вируса и определения генотипа и уровня виремии используется полимеразно-цепная реакция, цель которой заключается в подборе эффективной противовирусной терапии;

• при повышенных показателях печеночных проб, положительном результате иммунно-ферментного анализа и полимеразно-цепной реакции проводят клиническую диагностику, подбор противовирусной терапии и осуществляют контроль за эффективностью лечения гепатита С;

• при превышении нормы показателей печеночных проб и отрицательного результата иммунно-ферментного анализа и в случае превышения нормы в показателях печеночных проб, отрицательного результата полимеразно-цепной реакции и положительного результата иммунно-ферментного анализа проводят динамическое наблюдение за пациентом один раз в три месяца.

Клиническая диагностика гепатита С

Диагноз острого гепатита С ставится на основании клинических (увеличение печеночных проявлений – телеактоэктазии, печеночные ладони размеров печени и селезёнки), вирусологических (наличие в крови РНК вируса и/или антивируса), биохимических (повышенный уровень активности аминотрансфераз-АСТ и АЛТ) данных, имеющих четкую связь с парентеральными манипуляциями за первые месяцы до его развития: хирургическими операциями, переливанием крови, первой инъекцией наркотических средств и т.п.

К сожалению, у большинства больных отсутствуют признаки острого гепатита, и обнаружение РНК вируса не позволяет отличить острый гепатит от хронического гепатита. В данном случае диагностика при гепатите С должна основываться на наличии соответствующих данных эпидемического анамнеза за 1-4 месяца до впервые выявленных признаков гепатита С, которыми являются антитела к вирусу гепатита С и уровнями ферментемии.

К критериям для постановки диагноза хронический гепатит С относятся увеличение печени и селезенки, а также наличие гиперферментемии и антитела к вирусу гепатита С в крови в течение 6 месяцев. Точный характер поражения печени — стадию фиброза и степень некрозо-воспалительных изменений — позволяет определить биопсия печени, которая на сегодняшний день является наиболее точным и информативный метод диагностики хронического гепатита С. К тому же процедура проводится в течение нескольких секунд и абсолютно безопасна для пациента.

Отметим, что наличие или отсутствие РНК вируса гепатита не является диагностическим критерием хронического гепатита С, а только определяет фазу процесса (активный, неактивный).

Лабораторно-инструментальная диагностика хронических гепатитов в Европейском Медицинском Центре

Лабораторно-инструментальная диагностика хронических гепатитов в Европейском медицинском центре проводится согласно стандартам диагностики. В перечень утвержденных исследований входят:

• УЗИ органов брюшной полости;

• анализ крови на гепатит;

• коагулограмма;

• исследование уровня фракций билирубина в крови (АФП);

• исследование мочевины в крови;

• исследование уровня креатинина в крови;

• исследование уровня аминотрансферазы в крови (АСТ);

• исследование уровня аминотрансферазы в крови (АЛТ);

• исследование уровня гамма-глютамилтранспептидозы (ГГТП);

• исследование уровня щелочной фосфатазы в крови;

• исследование уровня калия в крови;

• исследование уровня натрия в крови;

• исследование уровня общих липидов в крови;

• исследование уровня альфа-фетопротеина в сыворотке крови;

• исследование уровня криоглобулинов в сыворотке крови;

• исследование антител к антигенам митохондрий;

• исследование антител к антигенам мышечной ткани;

• исследование антител к антигенам ядра клетки и ДНК;

• исследование кала на скрытую кровь;

• лапароскопия с осмотром печени и желчного пузыря;

• клинический анализ мочи;

• регистрация электрокардиограммы;

• определение HВsAg Hepatitis B virus;

• определение антител класса M, G (IgM, IgG) к Hepatitis C virus;

• определение антител класса M,G (IgM, IgG) к Hepatitis D virus;

• определение антигена HВeAg Hepatitis B virus;

• определение антител класса M, G (IgM, IgG) к HbeAg Hepatitis B virus;

• определение антител класса M, G (IgM, IgG) к HВсAg Hepatitis B virus;

• ПЦР РНК качественный, количественный, генотип крови на Hepatitis C virus;

• ПЦР ДНК качественный, количественный, генотип крови на Hepatitis В virus;

• ПЦР РНК качественный, количественный, генотип крови на Hepatitis D virus;

• ПЦР РНК качественный крови на Hepatitis G virus;

• биопсия печени;

• морфологическое исследование тканей печени;

• эзофагогастродуоденоскопия.

После того как сделаны все анализы на гепатит, и наличие вируса доказано, назначается лечение. Добавим, что эффективным считается лечение гепатита С, при котором не обнаруживается РНК вируса через 24 недели после прекращения приема лекарственных средств. При этом продолжительность курса лечения рассчитывается согласно показателю «вирусной нагрузки» — количества РНК вируса в крови.

www.emcmos.ru